学术不端文献论文查重检测系统 多语种 图文 高校 期刊 职称 查重 抄袭检测系统
TUNEL实际上是 分子生物学 与形态学相结合的研究方法,对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色,能准确地反应细胞凋亡典型的 生物化学 和形态特征,可用于石蜡包埋组织切片、冰冻组织切片、培养的细胞和从组织中分离的细胞的细胞形态测定,并可检测出极少量的凋亡细胞,因而在细胞凋亡的研究中被广泛采用。 Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。 Caspase-3正常以酶原 (32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个大亚基 (17KD)和两个小亚基 (12KD)组成,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。
凋亡细胞 DNA 含量的流式细胞计分析 方法 收集细胞→70% 冷乙醇(PBS 稀释)4 °C 固定过夜→PBS 洗涤,1 000 rpm × 10 min→RNase A(0.5 mg/ml)37 °C 消化 30 min→PI(50 mg/ml)染色,室温避光 15 min→FACScan 分析 DNA 亚二倍体的形成及细胞 ...
然而,凋亡细胞调节上述过程的机制目前仍不清楚。 作者的研究结果发现,凋亡代谢物分泌组(secretome)不是简单的被动排空细胞内容物,而是一个调控过程。 caspase介导的质膜PANX1通道开放,促进了细胞凋亡过程中持续释放有活力的代谢物。
细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ 期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased),部分染色质出现浓缩状态;Ⅱa 期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;Ⅱb 期的细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体(图 1)。 凋亡细胞体积变小,细胞质浓缩。 凋亡Ⅰ期(pro-apoptosis nuclei)的细胞核内染色质高度盘绕,出现许多称为气穴现象(cavitations)的空泡结构;Ⅱa 期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;细胞凋亡的晚期,细胞核裂解为碎块,产生凋亡小体(图 2)。 磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS 可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中(图 3)。